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產(chǎn)品展示/ PRODUCTS PLAY

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小鼠單克隆抗體Ig類/亞類ELISA試劑盒

描述:產(chǎn)品名稱:小鼠單克隆抗體Ig類/亞類ELISA試劑盒
產(chǎn)品貨號(hào):YXK9522
產(chǎn)品規(guī)格:2880/盒
儲(chǔ)存條件:詳見(jiàn)標(biāo)簽
本產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)用,不做其他用途。

  • 產(chǎn)品型號(hào):YXK9522
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時(shí)間:2024-10-08
  • 訪問(wèn)量:229
產(chǎn)品介紹/ PRODUCT PRESENTATION

小鼠單克隆抗體Ig類/亞類ELISA試劑盒
一、試劑原理:本試劑盒利用雙抗體夾心法鑒定小鼠淋巴細(xì)胞雜交瘤培養(yǎng)上清中單克隆抗體或特異親和純化單克隆抗體的類和亞類(可區(qū)分出IgG1\IgG2a\IgG2b\IgG3\IgM\IgA\Kappa\Lambda)。采用小鼠抗體共有位點(diǎn)的二抗包 被微孔板,與加入的培養(yǎng)上清中的小鼠抗體結(jié)合,再加入HRP標(biāo)記的抗小鼠各類、亞類、亞型的抗體來(lái)分別反應(yīng), 隨后用TMB底物系統(tǒng)顯色并用稀硫酸終止,再通過(guò)酶標(biāo)儀檢測(cè)吸光度來(lái)判斷被測(cè)單克隆抗體的類或亞類。本 試劑盒具有較高的分辨率,是您鑒定小鼠單克隆抗體類、亞類、亞型的可靠工具。

二、試劑組份:

酶標(biāo)板含自封袋2個(gè),2ⅹ96孔;標(biāo)本稀釋液15ml;通用陽(yáng)性對(duì)照1.8ml;顯色劑A15ml;通用陰性對(duì)照1.8ml;顯色劑B15ml;酶標(biāo)二抗         8種6×3.2ml;反應(yīng)終止液15ml;20×清洗液50mL;加樣圖2份;封板膜4張;說(shuō)明書(shū)1份。

三、使用范圍:用于培養(yǎng)上清中小鼠單克隆抗體Ig類、亞類、亞型的鑒定以及相關(guān)內(nèi)容的研究。

四、使用方法:

1、首先將試劑盒恢復(fù)室溫(大約30分),然后用純水把清洗液配成工作濃度(一份濃縮清洗液加19份純水)。

2、取出酶標(biāo)板。每個(gè)標(biāo)本需要8孔,陽(yáng)性對(duì)照8孔,陰性對(duì)照8孔。多余的用自封袋保存,記得放入干燥劑。

3、將標(biāo)本檢測(cè)孔每孔先加入標(biāo)本稀釋液各50μl。然后將50μl細(xì)胞培養(yǎng)上清(或特異親和純化的抗體)再加入酶標(biāo)微   孔板,每個(gè)標(biāo)本加8孔;陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照各8孔每孔100μl此處不加標(biāo)本稀釋液。貼上封板膜37℃溫育30分鐘。

4、棄去板內(nèi)液體,手工洗板5遍后在不掉纖維的吸水材料上拍干(或機(jī)洗5遍)。再在每個(gè)標(biāo)本的6孔中分別加入8種 酶標(biāo)二抗各100μl,通用陽(yáng)性、陰性對(duì)照的各孔也一樣。在加樣圖上或酶標(biāo)板上做好標(biāo)記。貼上封板膜37℃溫育30分鐘。

5、吸棄板內(nèi)液體,手工洗板5遍后在不掉纖維的吸水材料上拍干(或機(jī)洗5遍)。每孔分別加入顯色劑A和顯色劑B各50μl,換一張新的封板膜貼板避光37℃顯色20分鐘。

6、本試劑盒特異性好一般肉眼即可觀察出結(jié)果,看顯色藍(lán)的那個(gè)孔所對(duì)應(yīng)的酶標(biāo)二抗就知道此標(biāo)本的Ig類或亞類。更可將反應(yīng)終止液(每孔50μl)終止反應(yīng)后用酶標(biāo)儀450nm測(cè)定波長(zhǎng),630nm參考波長(zhǎng)雙波長(zhǎng)測(cè)定結(jié)果,參看高值孔所對(duì)應(yīng)的酶標(biāo)二抗就知道此標(biāo)本的Ig類或亞類亞型(陽(yáng)性對(duì)照OD一般不小于0.8,陰性對(duì)照一般不高于0.15,陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn):樣品OD大于陰性O(shè)D+0.15,陰性O(shè)D低于0.05按0.05算)。

五、產(chǎn)品特點(diǎn):高靈敏度、高特異性、結(jié)果容易判定。

六、保存條件:不開(kāi)啟2-8℃避光保存效期一年。不正確存放或過(guò)于頻繁開(kāi)啟使用有可能因此使效期縮短。

七、注意事項(xiàng):

1、雖然本試劑盒過(guò)期后很久還有使用價(jià)值但還是請(qǐng)您在標(biāo)簽注明的有效期內(nèi)使用。

2、在檢測(cè)腹水類單抗時(shí)要稀釋到1/5萬(wàn),雖然可以分辨但并不建議您這樣做。此類樣品成分十分復(fù)雜,有干擾結(jié)果的可能。在此種情況下您可以選擇本公司的貨號(hào)為C060102-L的鑒定試劑。它會(huì)給您帶來(lái)滿意的結(jié)果,同時(shí)您也可以使用抗原包被板替換試劑盒內(nèi)的包被板來(lái)解決此類問(wèn)題,但這種情況下陽(yáng)性對(duì)照不顯色屬于正常。

3、手洗板子時(shí)一定要把孔加滿,停留10秒然后棄盡,甩干凈。特別是在酶標(biāo)二抗溫育后洗板時(shí)一定要把酶吸出而不是甩出,要吸凈。這個(gè)在手工洗板時(shí)對(duì)結(jié)果很重要。

4、一次沒(méi)用完的板子要帶干燥劑放自封袋封好,隨盒存放。

5、拿放板子時(shí)不要?jiǎng)×叶秳?dòng),以免孔間交叉污染出現(xiàn)錯(cuò)誤結(jié)果。

6、本試劑一般不會(huì)出現(xiàn)兩個(gè)陽(yáng)性,但出現(xiàn)兩個(gè)陽(yáng)性的現(xiàn)象現(xiàn)實(shí)中是真實(shí)存在的,一般會(huì)一個(gè)OD很高,另一個(gè)很低但卻還能判為陽(yáng)性,實(shí)驗(yàn)分析表明這種情況下以O(shè)D高值孔為準(zhǔn),出現(xiàn)這種情況有多重原因:A、培養(yǎng)的細(xì)胞中有“飼養(yǎng)細(xì)胞"殘留,B、由于單抗研制存在人工干預(yù)步驟因此抗體本身有可能會(huì)存在亞類結(jié)構(gòu)上的輕微變異,    C、樣品為非特異親和純化的抗體或樣品是腹水,D、上清出現(xiàn)少量污染,E、實(shí)驗(yàn)操作粗放,F(xiàn)、加錯(cuò)試劑。

八、特別提示:不具備ELISA基礎(chǔ)知識(shí)和操作的人員不要完成此實(shí)驗(yàn)或類似實(shí)驗(yàn),因?yàn)檫@可能會(huì)給您帶來(lái)錯(cuò)誤的結(jié)果和不必要的損失

小鼠單克隆抗體Ig類/亞類ELISA試劑盒


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